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描述:NEX在中性環(huán)境中催化木聚糖降解成還原性寡糖和單糖,在沸水浴條件下進一步與3,5-二硝基水楊酸發(fā)生顯色反應(yīng),在540nm處有特征吸收峰.中性木聚糖酶檢測試劑盒
標(biāo)題:中性木聚糖酶檢測試劑盒
產(chǎn)品概述
中性木聚糖酶檢測試劑盒
測定意義
木聚糖酶(EC 3.2.1.8)主要由微生物產(chǎn)生,能催化水解木聚糖,也被稱為戊聚糖酶或半纖維素酶,可分解釀造或飼料工業(yè)中的原料細(xì)胞壁以及β-葡聚糖,降低釀造中物料的粘度,促進有效物質(zhì)的釋放,以及降低飼料中的非淀粉多糖,促進營養(yǎng)物質(zhì)的吸收利用,因而廣泛的應(yīng)用于釀造和飼料工業(yè)中,NEX一般分離自適生長pH為6-8的微生物。
測定原理
NEX在中性環(huán)境中催化木聚糖降解成還原性寡糖和單糖,在沸水浴條件下進一步與3,5-二硝基水楊酸發(fā)生顯色反應(yīng),在540nm處有特征吸收峰,反應(yīng)液顏色的深淺與酶解產(chǎn)生的還原糖量成正比,通過測定反應(yīng)液在540nm吸光值增加速率,可計算NEX活力。
自備實驗用品及儀器
天平、低溫離心機、恒溫水浴鍋,可見分光光度計、1 mL玻璃比色皿和蒸餾水。
試劑組成和配制
緩沖液:液體65mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:液體10mL×1瓶,4℃避光保存。
試劑二:液體15mL×1瓶,4℃避光保存。
粗酶提取
測定操作表
| 對照管 | 測定管 |
樣品(μL) | 200 | 200 |
緩沖液(μL) | 300 | 300 |
試劑一(μL) |
| 200 |
試劑二(μL) | 300 |
|
混勻,蓋緊瓶蓋,50℃水浴,反應(yīng)30min,立即沸水浴10min滅活。(注意不要讓蓋子爆開,以免進水,改變了反應(yīng)體系) | ||
試劑一(μL) | 200 |
|
試劑二(μL) |
| 300 |
混勻,沸水浴顯色5min(注意不要讓蓋子爆開,以免進水改變了反應(yīng)體系),1mL玻璃比色皿,對照管調(diào)零,測定A540。 |
注意事項
1. 吸光度變化應(yīng)該控制在0.01~0.8之間,否則加大樣品量或稀釋樣品,注意計算公式中參與計算的稀釋倍數(shù)要相應(yīng)改變;也可以延長或者縮短反應(yīng)時間。
2. 試劑盒2-8℃保存,保質(zhì)期3個月,建議盡快使用。
中性木聚糖酶檢測試劑盒
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