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P產(chǎn)品分類RODUCT CATEGORY
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描述:測(cè)定意義:NP在一定的溫度和中性pH條件下,催化水解蛋白質(zhì)。由于其安全無(wú)毒、水解能力強(qiáng)、作用范圍廣等特點(diǎn),中性蛋白酶常用于食品、飼料、化妝品和營(yíng)養(yǎng)保健品生產(chǎn)。測(cè)定原理:中性條件下,NP催化酪蛋白水解產(chǎn)生酪氨酸;在堿性條件下,酪氨酸還原磷鉬酸化合物生成鎢藍(lán);在680nm有特征吸收峰。中性蛋白酶檢測(cè)試劑盒
標(biāo)題:中性蛋白酶檢測(cè)試劑盒
產(chǎn)品概述
中性蛋白酶檢測(cè)試劑盒
自備儀器和用品:
可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量玻璃比色皿/96孔板、水浴鍋、磁力攪拌器、可調(diào)式移液槍、1.5 mL EP管和蒸餾水。
試劑組成和配置:
試劑一:液體×1瓶,4℃保存。
試劑二:粉劑×1瓶,4℃保存。臨用前加4mL蒸餾水溶解。
試劑三:粉劑×1瓶,4℃避光保存。臨用前加入4mL試劑一,沸水浴中磁力攪拌溶解。
試劑四:粉劑×1瓶, 4℃保存。臨用前加20mL蒸餾水溶解。
試劑五:液體×1瓶,4℃保存。
標(biāo)準(zhǔn)品:液體×1支,0.25μmol/mL標(biāo)準(zhǔn)酪氨酸溶液,4℃保存。
粗酶液提?。?/span>
稱約0.1g組織,加入1ml試劑一,冰上充分研磨,10000rpm 4℃離心10min,取上清,即粗酶液。
測(cè)定:
1.分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到680 nm,蒸餾水調(diào)零。
2.試劑二、試劑三和試劑四置于30℃水浴保溫30min以上。
3. 空白管:取0.5 mL EP管,加入20μL粗酶液,40μL試劑二,混勻后置于30℃水浴保溫10min;加入40μL試劑三,混勻后10000rpm 4℃離心10min;取40μL上清液,加入新的EP管,再加入200μL試劑四,40μL試劑五,混勻后置于30℃水浴保溫20min,取200μL于微量玻璃比色皿/96孔板,于680nm測(cè)定光吸收,記為A空白管。
4. 測(cè)定管:取0.5 mL EP管,加入20μL粗酶液,40μL試劑三,混勻后置于30℃水浴保溫10min;加入40μL試劑二,混勻后10000rpm 4℃離心10min;取40μL上清液,加入新的EP管,再加入200μL試劑四,40μL試劑五,混勻后置于30℃水浴保溫20min,取200μL于微量玻璃比色皿/96孔板,于680nm測(cè)定光吸收,記為A測(cè)定管。(注意與空白管不同,先加試劑三,后加試劑二)
5. 標(biāo)準(zhǔn)管:取0.5 mL EP管,加入40μL標(biāo)準(zhǔn)品,200μL試劑四,40μL試劑五,混勻后置于30℃水浴保溫20min,取200μL于微量玻璃比色皿/96孔板,于680nm測(cè)定光吸收,記為A標(biāo)準(zhǔn)管。
中性蛋白酶檢測(cè)試劑盒
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