描述:測定意義:AchE屬于絲氨酸水解酶,廣泛存在于各種動物組織和血清中。AchE催化乙酰膽堿(Ach)水解,在神經(jīng)傳導調節(jié)中起重要作用。測定原理:AchE催化Ach水解生成膽堿,膽堿與二硫對硝基苯甲酸(DTNB)作用生成5-巰基-硝基苯甲酸(TNB);TNB在412nm處有吸收峰,通過測定412 nm吸光度增加速率,計算AchE活性。乙酰膽堿酯酶(AchE)檢測試劑盒
標題:乙酰膽堿酯酶(AchE)檢測試劑盒
產品概述
乙酰膽堿酯酶(AchE)檢測試劑盒
自備儀器和用品:
紫外分光光度計/、微量石英比色皿/96孔板、低溫離心機、水浴鍋、可調式移液槍和蒸餾水。
試劑組成和配制:
試劑一:液體×1瓶,4℃保存。
試劑二:液體×1瓶,4℃保存。
試劑三:粉劑×1支,4℃保存。臨用前加入1.3 mL試劑二,充分震蕩溶解。
試劑四:粉劑×1支,4℃保存。臨用前加入1.3 mL試劑二,充分震蕩溶解。
粗酶液提?。?/span>
稱約0.1g組織,加入1mL試劑一,冰上充分研磨,10000rpm 4℃離心10min,取上清液,待測。
測定:
1. 分光光度計預熱30 min以上,調節(jié)波長到412 nm,蒸餾水調零。
2. 試劑二置于37℃水浴中預熱30min以上。
3. 空白管:取微量石英比色皿/96孔板,依次加入20μL蒸餾水、160 μL試劑二、10μL試劑三和10μL試劑四,迅速混勻,于412nm處測定3min內吸光值變化,第10s吸光值記為A1,第190s吸光值記為A2。只需做一支空白管,不需要每個樣品都做空白管。△A空白管=A2-A1
4. 測定管:取微量石英比色皿/96孔板,依次加入20μL上清液、160 μL試劑二、10μL試劑三和10μL試劑四,迅速混勻,于412nm處測定3min內吸光值變化,第10s吸光值記為A3,第190s吸光值記為A4。△A測定管=A4-A3
乙酰膽堿酯酶(AchE)檢測試劑盒
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