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描述:測(cè)定意義GOT( 2.6.1.1)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,催化可逆轉(zhuǎn)氨基反應(yīng),是氨基酸代謝的重要酶。此外,GOT在心肌細(xì)胞中含量gao ,臨床上一般常作為心肌梗塞和心肌炎的輔助檢查。肝臟損害時(shí)其血清濃度也可升高。谷草轉(zhuǎn)氨酶(GOT)檢測(cè)試劑盒
標(biāo)題:谷草轉(zhuǎn)氨酶(GOT)檢測(cè)試劑盒
產(chǎn)品概述
谷草轉(zhuǎn)氨酶(GOT)檢測(cè)試劑盒
測(cè)定原理
GOT催化 α-同戊二酸和天門冬氨酸發(fā)生轉(zhuǎn)氨基反應(yīng),生成谷氨酸和草酰乙酸,草酰乙酸進(jìn)一步自行脫羧生成丙酮酸;丙酮酸可與2,4-二硝基苯肼反應(yīng)生成2,4-二硝基苯腙,在堿性條件下顯棕紅色;測(cè)定505nm吸光度的變化,即可計(jì)算GOT酶活力。
需自備的儀器和用品
可見分光光度計(jì)、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
試劑的組成和配制
提取液:液體30mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:液體10 mL×1瓶, 4℃保存;
試劑二:液體15 mL×1瓶, 4℃保存;
試劑三:液體50 mL×1瓶,4℃保存;
樣品測(cè)定的準(zhǔn)備
1、 細(xì)胞或微生物樣品的制備 :
先收集細(xì)胞或微生物樣品到離心管內(nèi),棄上清,按照每500萬細(xì)胞或微生物加入1mL提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(功率20%,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次)。3500g,4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
2、組織:
稱取約0.1g組織,加入1mL提取液進(jìn)冰浴行勻漿。3500g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
3、血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。
測(cè)定操作表
試劑名稱(μL) | 測(cè)定管 | 對(duì)照管 |
待測(cè)樣本 | 20 |
|
試劑一 | 100 | 100 |
混勻后,37℃(哺乳動(dòng)物)或25℃(其它物種)預(yù)熱30min
試劑二 | 100 | 100 |
待測(cè)樣本 |
| 20 |
混勻后,37℃(哺乳動(dòng)物)或25℃(其它物種)準(zhǔn)確水浴20min
試劑三 | 1000 | 1000 |
混勻,室溫放置10min,在505nm波長(zhǎng)處,測(cè)各管吸光度。
谷草轉(zhuǎn)氨酶(GOT)檢測(cè)試劑盒
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