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描述:測(cè)定原理:GST催化GSH與CDNB結(jié)合,其結(jié)合產(chǎn)物的光吸收峰波長(zhǎng)為340nm;通過(guò)測(cè)定340nm波長(zhǎng)處吸光度上升速率,即可計(jì)算出GST活性。谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶(GST)檢測(cè)試劑盒
標(biāo)題:谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶(GST)檢測(cè)試劑盒
產(chǎn)品概述
谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶(GST)檢測(cè)試劑盒
測(cè)定意義:
GST是一種具有多種生理功能的蛋白質(zhì)家族,主要存在于細(xì)胞質(zhì)內(nèi)。GST是體內(nèi)解毒酶系統(tǒng)的重要組成部分,主要催化各種化學(xué)物質(zhì)及其代謝產(chǎn)物與GSH的巰基共價(jià)結(jié)合,使親電化合物變?yōu)橛H水物質(zhì),易于從膽汁或尿液中排泄,達(dá)到將體內(nèi)各種潛在或具備毒性的物質(zhì)降解并排出體外的目的。因此,GST在保護(hù)細(xì)胞免受親電子化合物的損傷中發(fā)揮著重要的生物學(xué)功能。此外,因?yàn)?/span>GST具有GSH-Px活性,亦稱為non-Se GSH-Px,具有修復(fù)氧化破壞的大分子如DNA、蛋白質(zhì)等的功能。注意,GST催化的反應(yīng)減少GSH含量,但是不增加GSSG含量。
自備儀器和用品:
低溫離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)節(jié)移液器、紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)/、微量石英比色皿/96孔板、和蒸餾水。
試劑組成和配置:
試劑一:液體×1瓶,4℃保存。
試劑二:液體×1瓶,4℃保存。
試劑三:粉劑×1瓶,4℃保存。臨用前加2 mL蒸餾水溶解。
粗酶液提取:
稱約0.1g樣品,加入1 mL試劑一,冰上充分研磨,10000rpm 4℃離心10min,取上清液待測(cè)。
測(cè)定:
1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30 min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到340 nm,用蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑三放在25℃(一般物種)或者37℃(哺乳動(dòng)物)保溫。
3. 空白管:取微量石英比色皿或96孔板,加入20μL試劑一,180μL試劑二和20μL試劑三,迅速混勻后于340nm測(cè)定吸光度變化,記錄10 s和310 s吸光度為A1和A2。
4. 測(cè)定管:取微量石英比色皿或96孔板,加入20μL上清液,180μL試劑二和20μL試劑三,迅速混勻后于340nm測(cè)定吸光度變化,記錄10 s和310 s吸光度為A3和A4。
谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶(GST)檢測(cè)試劑盒
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