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描述:測定意義GPT(EC 2.6.1.2)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中,催化氨基酸和酮酸轉(zhuǎn)氨基反應(yīng),在氨基酸代謝中具有重要作用。此外,哺乳動物肝細胞GPT活性很高,當(dāng)肝細胞壞死,GPT釋放到血液中,血清GPT活性顯著增高。因此,GPT被世界衛(wèi)生組織推薦為肝功能損害敏感的檢測指標。谷丙轉(zhuǎn)氨酶(GPT)檢測試劑盒
標題:谷丙轉(zhuǎn)氨酶(GPT)檢測試劑盒
產(chǎn)品概述
谷丙轉(zhuǎn)氨酶(GPT)檢測試劑盒
測定原理
GPT催化丙氨酸和α-酮戊二酸發(fā)生轉(zhuǎn)氨基反應(yīng),生成丙酮酸和谷氨酸;加入2,4-二硝基苯肼溶液,不僅終止上述反應(yīng),而且與酮酸中的羰基加成,生成丙酮酸苯腙;苯腙在堿性條件下呈紅棕色,可以在505nm讀取吸光值并計算酶活力。
試驗中所需的儀器和用品
可見分光光度計、水浴鍋、臺式離心機、可調(diào)式移液器、1 mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
試劑的組成和配制
提取液:30mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:液體10 mL×1瓶, 4℃保存;
試劑二:液體15 mL×1瓶, 4℃保存;
試劑三:液體50 mL×1瓶,4℃保存;
樣品測定的準備
1、 細胞或微生物樣品的制備 :
先收集細胞或微生物樣品到離心管內(nèi),棄上清,按照每500萬細胞或微生物加入1mL提取液,超聲波破碎細菌或細胞(功率20%,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次)。3500g,4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
2、組織:
稱取約0.1g組織,加入1mL提取液進冰浴行勻漿。3500g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
3、血清(漿)樣品:直接檢測。
測定操作表:
試劑名稱(μL) | 測定管 | 對照管 |
待測樣本 | 20 |
|
試劑一 | 100 | 100 |
混勻后,37℃(哺乳動物)或25℃(其它物種)預(yù)熱30min
試劑二 | 100 | 100 |
待測樣本 |
| 20 |
混勻后,37℃(哺乳動物)或25℃(其它物種)準確水浴20min
試劑三 | 1000 | 1000 |
混勻,室溫放置10min,在505nm波長處,測各管吸光度。
谷丙轉(zhuǎn)氨酶(GPT)檢測試劑盒
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