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淀粉分支酶(SBE)檢測試劑盒

描述:測定意義
SBE(EC 2.4.1.18)主要存在于植物中,是參與支鏈淀粉合成的關(guān)鍵酶,測定SBE活性在淀粉生物合成、優(yōu)質(zhì)農(nóng)作物品種選育和品質(zhì)遺傳改良研究中具有重要意義。
測定原理
淀粉和diian結(jié)合后在660nm有特征光吸收,SBE可切斷支鏈淀粉側(cè)支,從而降低了淀粉-dian復(fù)合物在660nm吸收值,一定時(shí)間內(nèi)吸光度下降的百分率可以反映SBE活性。
淀粉分支酶(SBE)檢測試劑盒

  • 產(chǎn)品型號(hào):
  • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
  • 更新時(shí)間:2019-11-07
  • 訪問量:625
產(chǎn)品詳情/ PRODUCT DETAIL

標(biāo)題:淀粉分支酶(SBE)檢測試劑盒

產(chǎn)品概述

淀粉分支酶(SBE)檢測試劑盒

需自備的的儀器和用品

可見分光光度計(jì)、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 mL玻璃比色皿、研缽、冰、蒸餾水

試劑的組成和配制

提取液液體60mL×1瓶,4保存;

試劑一:液體20mL×1瓶,4保存;

試劑二:粉劑×2支,4保存;臨用前每支加入1mL雙蒸水,充分溶解后備用;

試劑三:液體25mL×1瓶,4保存;

試劑四:液體5mL×1瓶,4保存;

粗酶液提取

稱取約0.1g組織加入1mL提取液,冰浴中勻漿。15000g 4離心15min,取上清,置冰上待測。

測定步驟

試劑名稱(μL

對(duì)照管

測定管

煮沸1min后滅活的粗酶液

250

 

粗酶液

 

250

試劑一

320

320

試劑二

30

30

混勻,37準(zhǔn)確保溫20 min,置沸水浴中1 min終止反應(yīng)(蓋緊防止水分散失),冷卻

試劑三

500

500

試劑四

40

40

混勻,室溫靜置10min,用蒸餾水調(diào)零,660nm讀取各管吸光值。

注意:

1、可以在不同對(duì)照管中加入不同樣品的粗酶液,然后集中進(jìn)行1min沸水浴處理。

2、試劑一如有沉淀,加入之前要使之充分溶解混勻。

SBE活力單位的計(jì)算

方法(一)按照蛋白濃度計(jì)算

單位的定義:以波長660nm的吸光度下降百分率表示,每mg蛋白在反應(yīng)體系中每降低1%dian藍(lán)值為一個(gè)酶活性單位。

  1. 活性(U/mg prot=A對(duì)照管-A測定管)/A對(duì)照管÷蛋白濃度(mg/mL) ×100

方法(二)按照樣本鮮重計(jì)算

單位的定義:以波長660nm的吸光度下降百分率表示,每g組織在反應(yīng)體系中每降低1%dian藍(lán)值為一個(gè)酶活性單位。

SBE活性(U/g 鮮重=A對(duì)照管-A測定管)/A對(duì)照管÷樣本鮮重(g/mL) ×100

 

淀粉分支酶(SBE)檢測試劑盒

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