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P產(chǎn)品分類RODUCT CATEGORY
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描述:測定意義SBE(EC 2.4.1.18)主要存在于植物中,是參與支鏈淀粉合成的關(guān)鍵酶,測定SBE活性在淀粉生物合成、優(yōu)質(zhì)農(nóng)作物品種選育和品質(zhì)遺傳改良研究中具有重要意義。測定原理淀粉和diian結(jié)合后在660nm有特征光吸收,SBE可切斷支鏈淀粉側(cè)支,從而降低了淀粉-dian復(fù)合物在660nm吸收值,一定時(shí)間內(nèi)吸光度下降的百分率可以反映SBE活性。淀粉分支酶(SBE)檢測試劑盒
標(biāo)題:淀粉分支酶(SBE)檢測試劑盒
產(chǎn)品概述
淀粉分支酶(SBE)檢測試劑盒
需自備的的儀器和用品
可見分光光度計(jì)、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 mL玻璃比色皿、研缽、冰、蒸餾水
試劑的組成和配制
提取液:液體60mL×1瓶,4℃保存;
試劑一:液體20mL×1瓶,4℃保存;
試劑二:粉劑×2支,4℃保存;臨用前每支加入1mL雙蒸水,充分溶解后備用;
試劑三:液體25mL×1瓶,4℃保存;
試劑四:液體5mL×1瓶,4℃保存;
粗酶液提取
稱取約0.1g組織加入1mL提取液,冰浴中勻漿。15000g ,4℃離心15min,取上清,置冰上待測。
測定步驟
試劑名稱(μL) | 對(duì)照管 | 測定管 |
煮沸1min后滅活的粗酶液 | 250 |
|
粗酶液 |
| 250 |
試劑一 | 320 | 320 |
試劑二 | 30 | 30 |
混勻,37℃準(zhǔn)確保溫20 min,置沸水浴中1 min終止反應(yīng)(蓋緊防止水分散失),冷卻
試劑三 | 500 | 500 |
試劑四 | 40 | 40 |
混勻,室溫靜置10min,用蒸餾水調(diào)零,660nm處讀取各管吸光值。
注意:
1、可以在不同對(duì)照管中加入不同樣品的粗酶液,然后集中進(jìn)行1min沸水浴處理。
2、試劑一如有沉淀,加入之前要使之充分溶解混勻。
SBE活力單位的計(jì)算
方法(一)按照蛋白濃度計(jì)算
單位的定義:以波長660nm的吸光度下降百分率表示,每mg蛋白在反應(yīng)體系中每降低1%dian藍(lán)值為一個(gè)酶活性單位。
方法(二)按照樣本鮮重計(jì)算
單位的定義:以波長660nm的吸光度下降百分率表示,每g組織在反應(yīng)體系中每降低1%dian藍(lán)值為一個(gè)酶活性單位。
SBE活性(U/g 鮮重)=(A對(duì)照管-A測定管)/A對(duì)照管÷樣本鮮重(g/mL) ×100
淀粉分支酶(SBE)檢測試劑盒
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