蛋白質(zhì)羰基檢測(cè)試劑盒

描述：測(cè)定意義
蛋白質(zhì)羰基是多種氨基酸在蛋白質(zhì)的氧化修飾過(guò)程中的早期標(biāo)志，其含量高低表明蛋白質(zhì)氧化損傷程度的大小，是衡量蛋白質(zhì)氧化損傷的主要指標(biāo)。
測(cè)定原理
羰基與2,4-二硝基苯肼反應(yīng)生成紅色2,4-二硝基苯腙，在370nm處有特征吸收峰。
蛋白質(zhì)羰基檢測(cè)試劑盒

產(chǎn)品型號(hào)：
廠商性質(zhì)：生產(chǎn)廠家
更新時(shí)間：2019-11-07
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產(chǎn)品詳情/ PRODUCT DETAIL

標(biāo)題：蛋白質(zhì)羰基檢測(cè)試劑盒

產(chǎn)品概述

蛋白質(zhì)羰基檢測(cè)試劑盒

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器

天平、恒溫水浴鍋、低溫離心機(jī)、漩渦震蕩儀、紫外分光光度計(jì)、1 mL石英比色皿和蒸餾水，無(wú)水乙醇，乙酸乙酯。

試劑組成和配制

提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存。

試劑一：粉劑0.1g×5支，4℃避光保存。（使用前根據(jù)樣品數(shù)，每支加1mL水溶解，每支為10個(gè)樣品用量）

試劑二：液體20mL×1瓶，4℃避光保存。

試劑三：液體20mL×1瓶，4℃保存。

試劑四：液體25mL×1瓶，4℃保存。

試劑五：根據(jù)測(cè)定樣品量，將乙酸乙酯和無(wú)水乙醇等體積混合。

試劑六：液體100mL×1瓶，4℃保存。

樣品處理

組織樣品：稱取約0.1g組織樣品，加入1mL提取液，充分勻漿后于4℃，5000rpm離心10min，取上清，加入0.1mL試劑一，室溫放置10min，4℃，12000rpm離心10min，取上清，然后取20μL測(cè)定蛋白含量，剩余的作為待測(cè)樣品。

測(cè)定步驟和操作表

	空白管	測(cè)定管
樣品（mL）	0.2	0.2
試劑二（mL）		0.4
試劑三（mL）	0.4
混勻，37℃避光反應(yīng)1h
試劑四（mL）	0.5	0.5
靜置5min，4℃，12000rpm離心15min，棄上清，留沉淀
試劑五（mL）	1.0	1.0
漩渦混勻，4℃，12000rpm離心10min，棄上清，留沉淀
試劑五（mL）	1.0	1.0
漩渦混勻，4℃，12000rpm離心10min，棄上清，留沉淀
試劑五（mL）	1.0	1.0
漩渦混勻，4℃，12000rpm離心10min，棄上清，留沉淀
試劑六（mL）	1.0	1.0
漩渦混勻，37℃溫育15min，沉淀全部溶解后，4℃，12000rpm離心15min，取上清，1mL石英比色皿，試劑六調(diào)零，測(cè)定OD₃₇₀

計(jì)算公式

蛋白質(zhì)羰基含量（μmol/mg prot）= 227.27×（OD₃₇₀_{測(cè)定管}－OD₃₇₀_{測(cè)定管}）÷樣品蛋白質(zhì)濃度注意事項(xiàng)：

1. 試劑一使用之前根據(jù)要測(cè)定的樣品數(shù)現(xiàn)配，配置好后4℃保存，若變?yōu)楹谏?，則不能使用。

2. 試劑二見光易分解，反應(yīng)需嚴(yán)格避光。

蛋白質(zhì)羰基檢測(cè)試劑盒

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