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描述:測定意義:丙酮酸通過乙酰CoA連接葡萄糖、脂肪酸和氨基酸三大代謝,起著重要的樞紐作用。 測定原理:丙酮酸與2,4-二硝基苯肼作用,生成丙酮酸-2,4-二硝基苯腙,在堿性溶液中呈櫻紅色。丙酮酸(PA)檢測試劑盒
標題:丙酮酸(PA)檢測試劑盒
產(chǎn)品概述
丙酮酸(PA)檢測試劑盒
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計、臺式離心機、可調(diào)式移液器、1 mL玻璃比色皿、研缽、冰、蒸餾水。
試劑的組成和配制:
提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;
試劑一:液體5mL×1瓶, 4℃保存;
試劑二:液體25mL×1瓶, 4℃保存。
丙酮酸提取:
1、細菌、細胞或組織樣品
收集細胞或細胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;每100萬細菌或細胞加入1mL提取液,超聲波破碎(功率20%,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次),靜置30min, 4000g,常溫離心10min,取上清待測。
稱取約0.1g組織,加入1mL提取液勻漿,靜置30min,4000g,常溫離心10min,取上清待測。
2、血清(漿)樣品
取100μL血清(漿)加入1mL提取液,充分混勻,靜置30min, 4000g,常溫離心10min,取上清待測。
測定步驟:
1、取300μL上清液+100μL試劑一于1.5mL EP管中,混勻,靜置2min。
2、加入500μL試劑二,混勻,于520nm波長處,用蒸餾水調(diào)零,記錄測定管吸光值A。
丙酮酸(PA)檢測試劑盒
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