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描述:信帆生物銷售膽固醇試劑盒,同時(shí)提供膽固醇檢測(cè)服務(wù),能夠幫你對(duì)樣本進(jìn)行膽固醇檢測(cè)。當(dāng)固醇類化合物與酸作用時(shí),可脫水并發(fā)生聚合反應(yīng),產(chǎn)生顏色物質(zhì)。
標(biāo)題:膽固醇檢測(cè)服務(wù)
產(chǎn)品概述
一、原理
當(dāng)固醇類化合物與酸作用時(shí),可脫水并發(fā)生聚合反應(yīng),產(chǎn)生顏色物質(zhì)。因此可先對(duì)食品樣品進(jìn)行皂化和提取,用硫磷鐵試劑作為顯色劑,測(cè)定食品中膽固醇的含量。
在樣品的冰乙酸提取液中加磷硫鐵試劑,膽固醇與試劑反應(yīng)產(chǎn)生紫紅色化合物,顏色的深淺與膽固醇的量成正比,可用分光光度計(jì)在波長(zhǎng)560nm處測(cè)定。
二、實(shí)驗(yàn)儀器及試材
1.儀器:分光光度計(jì)、水浴鍋
2.試劑:本實(shí)驗(yàn)用水均需用蒸餾水或去離子水。試劑純度均為分析純。
(1)石油醚(沸點(diǎn)30-60℃)、無(wú)水乙醇、冰乙酸。
(2)50%氫氧化鉀溶液:稱取50g氫氧化鉀,用蒸餾水溶解,并稀釋至100mL。
(3)25%氯化鈉溶液:稱取25g氯化鈉,用蒸餾水溶解,并稀釋至100mL。
(4)10%三氯化鐵溶液:將10gFeCl3·6H2O溶于磷酸中,定容至100mL,儲(chǔ)于棕色瓶中,冷藏保存。
(5)磷硫鐵試劑:取10%三氯化鐵溶液1.5mL于100mL棕色容量瓶?jī)?nèi),加濃硫酸定容至刻度。
(6)膽固醇標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)液:準(zhǔn)確稱取膽固醇100mg,溶于冰乙酸中,定容至100mL。
(7)膽固醇標(biāo)準(zhǔn)溶液:臨用前將儲(chǔ)液用冰乙酸稀釋10倍。
三、實(shí)驗(yàn)方法與步驟
1.樣品膽固醇提取
準(zhǔn)確稱取充分混勻的雞蛋約0.20g于25mL具塞比色管中,加入0.5mL50%氫氧化鉀溶液和4.5mL無(wú)水乙醇,振蕩混勻,在80℃恒溫水浴中皂化20min。皂化時(shí)每隔5min振搖一次使皂化*。皂化完畢,取出比色管,冷卻。加入3mL25%氯化鈉溶液后再加入10mL石油醚,蓋緊玻璃塞,振搖1min,靜置分層。
取上層石油醚液1mL,置于25mL具塞比色管內(nèi),在65℃水浴中讓石油醚自然揮發(fā)干,加入4mL冰乙酸,輕搖使膽固醇溶解,待測(cè)。
2.樣品和標(biāo)準(zhǔn)膽固醇含量測(cè)定另取兩支25mL具塞比色管,一支(空白管)加入4mL冰乙酸,一支(標(biāo)準(zhǔn)管)加入1mL膽固醇標(biāo)準(zhǔn)溶液(0.1mg/mL)和3mL冰乙酸。包括樣品管,各管分別加入2mL磷硫鐵試劑,混勻,25℃放置20min后在560nm波長(zhǎng)下比色。以空白管調(diào)零,測(cè)得吸光度。
四、計(jì)算
雞蛋膽固醇(mg/100g)=A樣/A標(biāo)╳0.025mg/mL╳4mL╳10mL/1mL╳100/M樣g
=A樣/A標(biāo)╳100/M樣(mg/100g)
五、實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)
濃硫酸、強(qiáng)堿溶液具有腐蝕性,小心操作。
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