標題:甘油三酯檢測服務
產品概述
甘油三酯含量測定試劑盒說明書
規(guī)格:100管/96樣 微量法
注意:正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。
測定意義:
TG是長鏈脂肪酸和甘油形成的脂肪分子,不僅是細胞膜的主要成分,也是重要呼吸底物。
測定原理:用異丙醇抽提取TG,KOH皂化TG后水解生成甘油及脂肪酸,過點酸氧化甘油生成甲醛,在氯離子存在下甲醛與乙酰丙酮縮合生成黃色物質,在420nm有特征吸收峰,其顏色的深淺與TG含量成正比。
自備實驗用品及儀器:可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、水浴鍋、可調式移液槍、雙蒸水
試劑組成和配置:試劑一:液體60mL×2瓶,4℃保存。
試劑二:液體5mL×1瓶,4℃保存。
試劑三:液體6mL×1瓶,4℃保存。
試劑四:液體2mL×1瓶,4℃避光保存。
試劑五:液體6mL×1瓶,4℃避光保存。
試劑六:液體6mL×1瓶,4℃避光保存。
標準品:液體1mL×1支,1mg/mL標準甘油三酯溶液,4℃避光保存。
TG的提取:
1、組織中TG的提取:按照組織質量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進行冰浴勻漿,8000g,4℃離心10min,取上清,即TG待測液。
2、細胞、細菌中TG的提?。合仁占?00-500萬細胞或細菌到離心管內,棄上清,加1mL試劑一,超聲波破碎1min(強度20%,超聲2s,停1s),8000g,4℃離心10min,取上清,即TG待測液。
3、血清(漿)樣品:直接測定。
測定操作:
1.可見分光光度計/酶標儀預熱30min,調節(jié)波長到420nm,蒸餾水調零。
2.水浴鍋預熱到65℃。
3.甘油三酯含量測定:
待冷卻后,置于微量石英比色皿/96孔板測定420nm處吸光值,記為A空,A標和A測。
注意:空白管和標準管只需測定一次。
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