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組織及血液堿性磷酸酶(AKP/ALP)

描述:測定意義:
AKP/ALP是一種含鋅的糖蛋白酶,在堿性環(huán)境中可水解各種天然及人工合成的磷脂單酯化合物。AKP/ALP廣泛分布于人體各臟器中,以肝臟為主。
組織及血液堿性磷酸酶(AKP/ALP)檢測試劑盒

  • 產(chǎn)品型號:
  • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
  • 更新時間:2019-11-07
  • 訪問量:964
產(chǎn)品詳情/ PRODUCT DETAIL

標題:組織及血液堿性磷酸酶(AKP/ALP)

產(chǎn)品概述

組織及血液堿性磷酸酶(AKP/ALP)檢測試劑盒

測定原理:

在堿性環(huán)境中,AKP/ALP催化磷酸苯二鈉生成游離酚;酚與4-氨基安替比林和鐵氰hua鉀反應紅色亞醌衍生物,在510nm有特征光吸收;通過測定510 nm吸光度增加速率,來計算AKP活性。

自備儀器和用品:

紫外分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、臺式離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器和蒸餾水。

試劑組成和配制:

試劑一:液體×1瓶,4保存。

試劑二:液體×1瓶,4℃避光保存。

試劑三:液體×1瓶,4℃避光保存。

試劑四:液體×1瓶,4℃避光保存,未變成藍綠色之前均可使用。

標準品:液體×1支(EP管中),2 μmol/mL酚標準液,4℃保存。

粗酶液提取:

準確稱取約0.1g組織,加試劑一1mL充分研磨,4℃、10000rpm離心10min,取上清液待測。血液可直接用于測定,或者適當稀釋后用于測定。

測定步驟:

1. 分光光度計預熱30min以上,調(diào)節(jié)波長到510 nm,蒸餾水調(diào)零。

2. 試劑三置于37℃水浴中預熱30 min以上。

3. 空白管:EP管,加入4μL蒸餾水,40μL試劑二,40μL試劑三,混勻后置于37℃水浴中保溫15min;加入試劑四120μL,混勻后于510nm測定吸光度,記為A空白管。

4. 標準管:EP管,加入4μL標準品,40μL試劑二,40μL試劑三,混勻后置于37℃水浴中保溫15min;加入試劑四120μL,混勻后于510nm測定吸光度,記為A標準管。

5. 對照管: EP管,加入40μL試劑二,40μL試劑三,混勻后置于37℃水浴中保溫15min;加入試劑四120μL,混勻;后加入4μL上清液,混勻后于510nm測定吸光度,記為A對照管。

6. 測定管:EP管,加入4μL上清液,40μL試劑二,40μL試劑三,混勻后置于37℃水浴中保溫15min;加入試劑四120μL,混勻后于510nm測定吸光度,記為A測定管。

其中標準管和空白管只需做一管,測定管和對照管每個樣均需做。

注意事項:

1.試劑二、試劑三和試劑四均需避光保存。

2.試劑四變藍綠色后不能再使用。

3.加入試劑四后必須立即混勻,否則顯色不*。

組織及血液堿性磷酸酶(AKP/ALP)檢測試劑盒

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