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描述:測定意義:FFA既是脂肪水解的產(chǎn)物,又是脂肪合成的底物。血清中FFA的濃度與脂類代謝、糖代謝、內(nèi)分泌功能有關(guān)。測定原理:FFA與銅離子結(jié)合形成脂肪酸銅鹽,并溶于氯fang;利用銅試劑法測定銅離子含量,即可推算出游離脂肪酸含量。游離脂肪酸含量(FFA)檢測試劑盒
標(biāo)題:游離脂肪酸含量(FFA)檢測試劑盒
產(chǎn)品概述
游離脂肪酸含量(FFA)檢測試劑盒
自備儀器和用品:
研缽、冰、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液槍、可見分光光度計/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、一個25 mL玻璃瓶、兩個10 mL玻璃瓶、正庚烷、無水甲醇、氯fang(三氯jia烷)、無水乙醇和蒸餾水。
試劑組成和配制:
試劑一:液體×1瓶,室溫保存。
試劑二:自備。實驗前1 d,加入4.8 mL正庚烷,0.2 mL無水甲醇,5 mL氯fang(自備),蓋緊后混勻,室溫保存。
試劑三:液體×1瓶,室溫保存。
試劑四:粉劑×1瓶,4℃保存。臨用前在試劑瓶中加入4 mL無水乙醇,充分溶解。
標(biāo)準(zhǔn)品:粉劑×1瓶,室溫保存。臨用前加入7.8 mL氯fang充分溶解,即為500μmol/L的棕櫚酸標(biāo)準(zhǔn)溶液。
樣品中FFA提?。?/span>
1、血液中FFA測定:將所取血液,室溫靜置1 h 后,于4 ℃ 離心機(jī)3 500 rpm離心15min,取上層血清置于-20℃冰箱保存,待測
2、組織中FFA含量測定:組織用生理鹽水沖洗干凈后,用吸水紙吸取表面水分,稱取約0.1g,加入1 mL試劑一,勻漿后,8000rpm,4℃離心10min,取上清液,稀釋5倍,待測。
測定:
1. 分光光度計預(yù)熱30 min以上,調(diào)節(jié)波長到550 nm,蒸餾水調(diào)零。
2. 空白管:取0.5mL EP管,加入10μL蒸餾水,100μL試劑二,40μL試劑三,40μL試劑四,蓋緊后充分震蕩混勻(2min),倒入微量石英比色皿/96孔板,靜置15min,于550nm光吸收,記為A空白管。
3. 標(biāo)準(zhǔn)管:取0.5mL EP管,加入10μL標(biāo)準(zhǔn)液,100μL試劑二,40μL試劑三,40μL試劑四,蓋緊后充分震蕩混勻(2min),倒入微量石英比色皿/96孔板,靜置15min,于550nm光吸收,記為A標(biāo)準(zhǔn)管。
4. 測定管:取0.5mL EP管,加入10μL上清液,100μL試劑二,40μL試劑三,40μL試劑四,蓋緊后充分震蕩混勻(2min),倒入微量石英比色皿/96孔板,靜置15min,于550nm光吸收,記為A測定管。
注意事項:
1. 試劑四配制應(yīng)盡量晚配,可在操作到加入試劑三時,再配制試劑四。
2. 該試劑盒不可用塑料比色皿和96孔板測定,需用玻璃比色皿。
游離脂肪酸含量(FFA)檢測試劑盒
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