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描述:測定意義:DHAR存在于細(xì)胞質(zhì)、線粒體和葉綠體中。DHAR催化GSH還原DHA生成AsA和GSSG,調(diào)控細(xì)胞AsA/DHA比值,是抗壞血酸-谷胱甘肽氧化還原循環(huán)的關(guān)鍵酶。提高植物體內(nèi)的 DHAR 活性,可提高植物食品中AsA含量,進(jìn)而提高植物食品的營養(yǎng)品質(zhì)。脫氫抗壞血酸還原酶(DHAR)活性檢測試劑盒
標(biāo)題:脫氫抗壞血酸還原酶(DHAR)活性檢測試劑盒
產(chǎn)品概述
脫氫抗壞血酸還原酶(DHAR)活性檢測試劑盒
測定原理:
DHAR催化GSH還原DHA生成AsA,通過測定DHA減少速率,計算DHAR活性。
實(shí)驗(yàn)中所需儀器及設(shè)備:
研缽、冰、低溫離心機(jī)、紫外分光光度計/、微量石英比色皿/96孔板、可調(diào)式移液器和蒸餾水。
試劑組成和配制:
試劑一:液體50 mL×1瓶,4℃保存。
試劑二:液體35 mL×1瓶,4℃保存。
試劑三:粉劑×1瓶(棕色),4℃保存。臨用前加入2.5 mL蒸餾水充分溶解。
試劑四:粉劑×1瓶,4℃保存。臨用前加入2.5 mL蒸餾水充分溶解。
粗酶液提?。?/span>
稱取約0.1g樣品,加試劑一1 mL,冰上充分研磨,16000g 4℃離心20min,取上清液待測。
DHAR測定操作:
1. 分光光度計預(yù)熱30 min,調(diào)節(jié)波長到265nm,蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑二在25℃水浴鍋中預(yù)熱30 min以上。
3. 空白管:在微量石英比色皿/96孔板中依次加入20μL蒸餾水、20μL試劑三、20μL試劑四和140μL 試劑二,迅速混勻后于265nm比色,記錄30s和150s的吸光值。
4. 測定管:在微量石英比色皿/96孔板中依次加入20μL上清液、20μL試劑三、20μL試劑四和140μL 試劑二,迅速混勻后于265nm比色,記錄30s和150s的吸光值。
脫氫抗壞血酸還原酶(DHAR)活性檢測試劑盒
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