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描述:測定原理:AI催化蔗糖降解產(chǎn)生還原糖,進一步與3,5-二硝基水楊酸反應,生成棕紅色氨基化合物,在510nm有特征光吸收,在一定范圍內(nèi)510nm光吸收增加速率與AI活性成正比。酸性轉(zhuǎn)化酶(AI)檢測試劑盒
標題:酸性轉(zhuǎn)化酶(AI)檢測試劑盒
產(chǎn)品概述
酸性轉(zhuǎn)化酶(AI)檢測試劑盒
測定意義:
蔗糖轉(zhuǎn)化酶(Invertase,Ivr)催化蔗糖不可逆地分解為果糖和葡萄糖,是高等植物蔗糖代謝關鍵酶之一。根據(jù)適 pH,Ivr分為酸性轉(zhuǎn)化酶(AI)和中性轉(zhuǎn)化酶(NI)兩種類型。
AI(EC 3.2.1.26)主要存在于細胞液泡或自由空間中,適 pH 為4.5~5.0(酸性),通過降解液泡中蔗糖,調(diào)節(jié)液泡中蔗糖的利用和果實內(nèi)糖類的積累。
自備用品:
可見分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
試劑組成和配制:
提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;
試劑一:液體50mL×1瓶,4℃保存;
試劑二:粉劑×1瓶,4℃保存;臨用前加入25mL試劑一充分溶解備用;用不完的試劑4℃保存;
試劑三:液體30mL×1瓶,4℃保存;
粗酶液提?。?/span>
稱取約0.2g組織,加入1mL提取液進行冰浴勻漿;12000g,4℃,離心20min,取上清,置冰上待測。
測定步驟和加樣表:
試劑名稱(μL) | 測定管 | 對照管 |
粗酶液 | 200 | 200 |
試劑一 |
| 800 |
試劑二 | 800 |
|
混勻, 37℃準確水浴30min后,煮沸10min左右(蓋緊,以防水分散失),流水冷卻后充分混勻(以保證濃度不變)
試劑三 | 500 | 500 |
混勻,煮沸10min左右(蓋緊,以防止水分散失),流水冷卻后充分混勻, 510nm處記錄各管吸光值A,如果吸光值大于2,可以用蒸餾水稀釋后測定,ΔA=A測定-A對照。
酸性轉(zhuǎn)化酶(AI)檢測試劑盒
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