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描述:測(cè)定意義: SOD(EC 1.15.1.1)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,催化超氧化物陰離子發(fā)生岐化作用,生成H2O2和O2。SOD不僅是超氧化物陰離子清除酶,也是H2O2主要生成酶,在生物抗氧化系統(tǒng)中具有重要作用。超氧化物歧化酶(SOD)檢測(cè)試劑盒
標(biāo)題:超氧化物歧化酶(SOD)檢測(cè)試劑盒
產(chǎn)品概述
超氧化物歧化酶(SOD)檢測(cè)試劑盒
測(cè)定原理:
通過黃嘌呤及黃嘌呤氧化酶反應(yīng)系統(tǒng)產(chǎn)生超氧陰離子(O2-.),O2-.可還原氮藍(lán)四唑生成藍(lán)色甲臜,后者在560nm處有吸收;SOD可清除O2-.,從而抑制了甲臜的形成;反應(yīng)液藍(lán)色越深,說明SOD活性愈低,反之活性越高。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水
試劑的組成和配制:
提取液:60mL×1瓶,4℃保存;
試劑一:15mL×1瓶,4℃保存;
試劑二:粉劑×5瓶,4℃保存,用時(shí)每支加5.4mL雙蒸水,充分溶解,現(xiàn)配現(xiàn)用;
試劑三:液體350uL×1支,4℃保存;
試劑四:液體10mL×1瓶,4℃保存。
粗酶液提?。?/span>
1、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備 :
收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照每200萬細(xì)菌或細(xì)胞加入400μL提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(功率20%,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
稱取約0.1g組織,加入1mL提取液進(jìn)行冰浴勻漿;8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
2、血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。
測(cè)定步驟和操作表:
試劑名稱(uL) | 測(cè)定管 | 對(duì)照管 |
試劑一 | 240 | 240 |
試劑二 | 510 | 510 |
試劑三 | 6 | 6 |
樣品 | 90 |
|
試劑四 | 180 | 180 |
雙蒸水 |
| 90 |
充分混勻,室溫靜置30min后,加入1mL玻璃比色皿,560nm處測(cè)定各管吸光值。
注意事項(xiàng):
1、測(cè)定前將試劑一、二和四室溫放置,使試劑的溫度不低于室溫后再測(cè)定。
2、試劑三為酶,不可冷凍,使用時(shí)在冰上放置。
3、對(duì)照管只需要做一管。
超氧化物歧化酶(SOD)檢測(cè)試劑盒
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