P產(chǎn)品分類RODUCT CATEGORY
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產(chǎn)品名稱:明膠酶譜法檢測試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格:50T
儲存:按照說明書分別于4度和20度保存
有效期:6個月
簡介:
基質(zhì)金屬蛋白酶 (Matrix metalloproteinase ,MMP) 屬于金屬蛋白酶家族,該家族由至少 20 個成員組成,并且已知參與細(xì)胞外基質(zhì)蛋白的代謝。它們以無活性的酶原形式分泌,活化后能夠降解細(xì)胞外基質(zhì)的膠原蛋白,又稱膠原酶。通過影響細(xì)胞外基質(zhì),膠原酶參與胚胎發(fā)育、形態(tài)發(fā)生、組織重塑等過程,并參與炎癥、腫瘤、心血管、神經(jīng)等許多疾病過程。血漿與組織中的MMP-2、MMP-9參與各種生理與病理過程,其在臨床診斷和治療中的意義日益受到重視。MMP 可通過酶譜法廣泛檢測。MMP2 & MMP9 Gelatin-Zymography Kit提供了一個簡單的酶譜電泳系統(tǒng),用于檢測血液、體液、分泌物、細(xì)胞裂解液、細(xì)胞培養(yǎng)基等樣品中的MMP2,MMP9酶譜及活性。
檢測原理:
本試劑盒采用凝膠反相酶譜法(Zymography)檢測MMP-2、MMP-9 活性及其無活性前體酶原譜系。Zymography 是一種廣為使用的、基于SDS-PAGE 電泳和反相凝膠染色的蛋白酶檢測方法,其靈敏度可達(dá)1 nM,高于ELISA方法,其基本原理和程序是:制備含有膠原酶底物的SDS-PAGE凝膠,含蛋白酶的樣品在此凝膠中進(jìn)行電泳,電泳時SDS與樣本中的MMP可逆性結(jié)合,導(dǎo)致MMP氫鍵和疏水鍵破壞而不能發(fā)揮分解明膠的作用。電泳結(jié)束后取出凝膠與酶反應(yīng)Buffer孵育,MMP恢復(fù)活性,凝膠中由于含底物蛋白而被深染,形成深色背景,但在有蛋白酶條帶的位置,蛋白酶將降解凝膠中的底物蛋白,因而不被染色而形成透亮區(qū)域,從而能同時指示MMP-2、MMP-9 的大小位置(酶譜)及活性。本試劑盒提供MMP-2、MMP-9 特異蛋白底物及酶學(xué)反應(yīng)緩沖液,可檢測少至0.1~0.5 μl 血液中的MMP-2、MMP-9 酶譜及活性,檢測靈敏度~1nM。試劑盒可進(jìn)行25-50次標(biāo)準(zhǔn)小膠檢測(如果樣本MMP含量高,孵育時間短,不用換液可最多50次),如果小膠加樣孔為10~15個,則總計可最多檢測500~750個樣品。
如果小膠加樣孔為10~15個,則總計可最多檢測500~750個樣品。
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