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糖原含量試劑盒說明書 微量法

更新時間:2024-08-09      瀏覽次數(shù):165

產(chǎn)品名稱:糖原含量試劑盒說明書

規(guī)格:微量法, 100 管/96 樣


正式測定前務(wù)必取 2-3個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定

測定意義:

糖原是由葡萄糖單位構(gòu)成的高分子多糖,是糖的主要的儲存形式之一,主要貯存在肝和肌肉中作為備用能量,分別稱為肝糖原和肌糖原。肝糖原可調(diào)節(jié)血糖濃度,當血糖升高時可在肝臟合成糖原,血糖降低時,肝糖原則分解為葡萄糖以補充血糖。因此,肝糖原對維持血糖的相對平衡十分重要。肌糖原是肌肉中糖的儲存形式,在劇烈運動消耗大量血糖時,肌糖原不能直接分解成血糖,必須先分解產(chǎn)生乳酸,隨血液循環(huán)到肝臟,通過糖異生轉(zhuǎn)變?yōu)楦翁窃蚱咸烟恰?/span>

測定原理:

蒽酮法。利用強堿性提取液提取糖原,在強酸性條件下利用蔥酮顯色劑測定糖原含量。

需自備的儀器和用品:

可見分光光度計/酶標儀、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、濃-硫-酸(不允許快遞)和蒸餾水。

糖原提取:

1、細胞或細菌:收集 500~1000 萬細菌或細胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;加入 0.75mL 提取液超聲波破碎細菌或細胞(功率 20%或 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);轉(zhuǎn)移至10mL 試管中,95℃水浴 20min(蓋緊,防止水分散失),隔5min 振搖試管1次,使充分混勻:取出試管冷卻后,用蒸餾水定容到 5ml,混勻,8000g25℃離心10min,取上清液待測。

2、組織:稱取 0.1~0.2g 樣品,加入 0.75m 提取液充分勻漿;轉(zhuǎn)移至 10ml 試管中;95℃水浴 20min(蓋緊,防止水分散失),隔 5min 振搖試管1次,使充分混勻;待組織全部溶解后,取出試管冷卻后,用蒸餾水定容到 5ml,混勻,8000g25℃離心 10min,取上清液待測。


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