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描述:測定意義:FAS是脂肪酸合成關(guān)鍵酶,催化乙酰輔酶A和丙二酰輔酶A而生成長鏈脂肪酸。FAS普遍表達于各種組織細胞中,在哺乳動物肝、腎、腦、肺和乳腺以及脂肪組織中表達豐富。測定原理:FAS催化乙酰CoA、丙二酰CoA和NADPH生成長鏈脂肪酸和NADP+;NADPH在340nm有吸收峰,而NADP+沒有;通過測定340nm 光吸收下降速率,計算FAS活性。脂肪酸合成酶(FAS)檢測試劑盒
標題:脂肪酸合成酶(FAS)檢測試劑盒
產(chǎn)品概述
脂肪酸合成酶(FAS)檢測試劑盒
自備儀器和用品:
研缽、冰、臺式離心機、紫外分光光度計/、微量石英比色皿/96孔板、可調(diào)式移液槍和蒸餾水。
試劑組成和配制:
試劑一:液體×1瓶,-20℃保存。用前1d取出置于4℃充分解凍后混勻。
試劑二:粉劑×1瓶。臨用前加入440μL試劑四,充分溶解。
試劑三:粉劑×1瓶,4℃保存。臨用前加入440μL試劑四,充分溶解。
試劑四:液體×1瓶, 4℃保存。
試劑五:粉劑×1瓶,4℃保存。臨用前加入840μL試劑四,充分溶解。
粗酶液提取:
稱取約0.1g樣品,加試劑一1 mL充分研磨,16000rpm 4℃離心40min,取上清液,待測。
FAS測定操作:
1. 分光光度計預(yù)熱30min,調(diào)節(jié)波長到340 nm,蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑四置于40℃水浴中預(yù)熱30 min以上。
3. 空白管:在500μL EP管中依次加入20μL蒸餾水、4μL試劑二、4μL試劑三、164μL試劑四和8μL試劑五,迅速混勻后于340nm處測定吸光值,記錄第30s和90s時吸光值,分別記錄為A1和A2。△A空=A1-A2。
4. 測定管:在500μL EP管中依次加入20μL上清液、4μL試劑二、4μL試劑三、164μL試劑四和8μL試劑五,迅速混勻后于340nm處測定吸光值,記錄第30s和90s時吸光值,分別記錄為A1和A2。△A測=A3-A4。
注意事項:
上清液蛋白質(zhì)濃度需要另外測定,建議使用本公司BCA蛋白質(zhì)含量測定試劑盒。
脂肪酸合成酶(FAS)檢測試劑盒
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