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脯氨酸(PRO)含量試劑盒

描述:測(cè)定原理:
用磺基水楊酸(SA)提取Pro,加熱處理后,Pro與酸性茚三酮溶液反應(yīng)生成紅色;加甲苯萃取后,在520nm測(cè)定吸光度。
脯氨酸(PRO)含量試劑盒

  • 產(chǎn)品型號(hào):
  • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
  • 更新時(shí)間:2019-11-07
  • 訪問(wèn)量:482
產(chǎn)品詳情/ PRODUCT DETAIL

標(biāo)題:脯氨酸(PRO)含量試劑盒

產(chǎn)品概述

脯氨酸(PRO)含量試劑盒

測(cè)定意義:

Pro廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,逆境條件下,植物體內(nèi)Pro含量顯著增加。Pro增加量在一定程度上反映了抗逆性,抗旱性強(qiáng)的品種往往積累較多的脯氨酸。因此,脯氨酸增加量可以作為抗逆育種的生理指標(biāo)之一。

需自備的儀器和用品:

可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、冰乙酸25mL、甲苯50mL、研缽、冰和蒸餾水。

試劑的組成和配制:

提取液:液體50mL×1瓶,4保存。

試劑一:冰乙酸25 mL×1瓶, 4保存。(自備)

試劑二:液體25 mL×1瓶, 4保存。

試劑三:甲苯50mL×1瓶,4保存。(自備)

樣品測(cè)定的準(zhǔn)備:

1、細(xì)胞、細(xì)菌或組織樣品的制備

細(xì)菌或細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),棄上清;按照每500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(功率20%,超聲3秒,間隔10秒,重復(fù)30次),之后置沸水浴振蕩提取10min10000g,常溫離心10min,取上清,冷卻后待測(cè)。

組織:稱取約0.1g組織,加入1mL提取液進(jìn)行冰浴勻漿;之后置沸水浴振蕩提取10min,10000g,常溫離心10min,取上清,冷卻后待測(cè)。

2、血清(漿)樣品:取100μL血清(漿)加入1mL提取液,充分混勻,之后置沸水浴振蕩提取10分鐘,10000g,常溫離心10分鐘,取上清,冷卻后待測(cè)。

測(cè)定步驟:

  1. 分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至520nm,蒸餾水調(diào)零。
  2. 樣本測(cè)定:

(1) 0.25mL上清液+0.25mL試劑一+0.25mL試劑二 2mL有蓋EP管中,置沸水浴中保溫30min(蓋緊,防止水分散失),每10min振蕩一次。

(2) 待冷卻后,加入0.5mL試劑三,振蕩30s,靜置片刻,使色素轉(zhuǎn)至試劑三中;吸取0.2mL上層溶液于微量石英比色皿或96孔板中,于520nm波長(zhǎng)處比色,記錄吸光A。

脯氨酸(PRO)含量試劑盒

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