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P產(chǎn)品分類RODUCT CATEGORY
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描述:測(cè)定意義: GOGAT分布于植物中,和谷氨酰胺合成酶共同構(gòu)成GS/GOGAT循環(huán),參與氨同化的調(diào)控。測(cè)定原理:GOGAT催化谷氨酰胺的氨基轉(zhuǎn)移到α-酮戊二酸,形成兩分子的谷氨酸;同時(shí)NADH氧化生成NAD+,340nm吸光度的下降速率可以反映GOGAT活性大小。谷氨酸合成酶(GOGAT)檢測(cè)試劑盒
標(biāo)題:谷氨酸合成酶(GOGAT)檢測(cè)試劑盒
產(chǎn)品概述
谷氨酸合成酶(GOGAT)檢測(cè)試劑盒
需自備的儀器和用品:
紫外分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
試劑組成和配制:
提取液:液體60mL×1瓶,4℃保存;
試劑一:液體60mL×1瓶,4℃保存;
試劑二:粉劑×1支,4℃保存;
試劑三:粉劑×1支,4℃保存;
試劑四:粉劑×1支,-20℃保存。
粗酶液提?。?/span>
1、收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照每500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(功率20%,超聲3秒,間隔10秒,重復(fù)30次);8000g4℃離心10分鐘,取上清,置冰上待測(cè)。
2、稱取約0.1g組織,加入1mL提取液進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10分鐘,取上清,置冰上待測(cè)。
測(cè)定步驟:
(1)工作液的配制:臨用前將試劑二、三、四轉(zhuǎn)移到試劑一中混合溶解,置于37℃(哺乳動(dòng)物)或25℃(其它物種)水浴5min;
(2)取1mL工作液和0.1mL樣本于1mL比色皿中,混勻,加樣本的同時(shí)開始計(jì)時(shí),在340 nm波長(zhǎng)下記錄20秒時(shí)的初始吸光度A1和5分20秒時(shí)的吸光度A2,計(jì)算ΔA=A1-A2。
谷氨酸合成酶(GOGAT)檢測(cè)試劑盒
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