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描述:測定意義:MDHAR催化MDHA還原生成AsA,在抗壞血酸氧化還原代謝中具有重要作用。測定原理:MDHAR 催化 NADH 還原MDHA 生成 AsA和NAD+,NADH在340 nm有特征吸收峰,但是NAD+沒有。通過測定340 nm光吸收下降速率,來計算出MDHAR活性。單脫氫抗壞血酸還原酶(MDHAR)檢測試劑盒
標(biāo)題:單脫氫抗壞血酸還原酶(MDHAR)檢測試劑盒
產(chǎn)品概述
單脫氫抗壞血酸還原酶(MDHAR)檢測試劑盒
實驗中所需儀器及設(shè)備:
研缽、冰、臺式離心機、紫外分光光度計/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、可調(diào)式移液槍和雙蒸水
試劑組成和配置:
試劑一:液體×1瓶,4℃保存。
試劑二:液體×1瓶,室溫保存。
試劑三:粉劑×1瓶(棕色),4℃保存。臨用前加入3 mL蒸餾水充分溶解。
試劑四:粉劑×1瓶,4℃保存。臨用前加入2.5 mL蒸餾水充分溶解。
試劑五:液體×1瓶,4℃保存。臨用前加3 mL試劑二充分溶解。
粗酶液提?。?/span>
稱取約0.1g樣品,加試劑一1 mL,冰上充分研磨,16000g 4℃離心20min,取上清液待測。
MDHAR測定操作:
1. 分光光度計預(yù)熱30 min,調(diào)節(jié)波長到340 nm,蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑二在25℃水浴鍋中預(yù)熱30 min。
3. 空白管:依次在微量石英比色皿/96孔板中加入20μL試劑三、20μL試劑四、20μL試劑五和120μL試劑二,后加入20μL蒸餾水,迅速混勻后于340nm比色,記錄30s和150s的吸光值。
4. 測定管:依次在微量石英比色皿/96孔板中加入20μL試劑三、20μL試劑四、20μL試劑五和120μL試劑二,后加入20μL上清液,迅速混勻后于340nm比色,記錄30s和150s的吸光值。
單脫氫抗壞血酸還原酶(MDHAR)檢測試劑盒
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