描述:測定意義:ADH是生物體內短鏈醇代謝的關鍵酶,催化乙醇與乙醛可逆轉換,在很多生理過程中起著重要作用。哺乳動物ADH主要在肝臟生成,肝臟損傷導致ADH釋放到血清中。血清ADH活性高低反映了肝功能是否異常。乙醇脫氫酶(ADH)檢測試劑盒
標題:乙醇脫氫酶(ADH)檢測試劑盒
產品概述
乙醇脫氫酶(ADH)檢測試劑盒
測定原理:
ADH催化NADH還原乙醛生成乙醇和NAD+,NADH在340nm處有吸收峰,而NAD+沒有;測定340nm 吸光度下降速率,來計算ADH活性。
自備儀器和用品:
研缽、冰、低溫離心機、紫外分光光度計/、微量石英比色皿/96孔板、可調式移液器和蒸餾水。
試劑組成和配制:
試劑一:液體×1瓶,室溫保存。
試劑二:液體×1瓶,4℃保存。臨用前把試劑三轉移到試劑二中,4℃保存。
試劑三:粉劑×1瓶,-20℃保存。
試劑四:液體×1支,4℃保存。
粗酶液提?。?/span>
1、稱取約0.1g樣品,加試劑一1ml,冰上充分研磨,16000g 4℃離心20min,取上清待測。2、血清可以直接用于測定。
ADH測定操作:
1. 分光光度計預熱30 min,調節(jié)波長到340 nm,蒸餾水調零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min以上。
3. 空白管:在微量石英比色皿/96孔板中依次加入20μL蒸餾水、160μL試劑二和20μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時吸光值,分別記為A1和A2。△A空白管=A1-A2??瞻坠苤恍枳?/span>1~2個。
4. 測定管:在微量石英比色皿/96孔板中依次加入20μL上清液、160μL試劑二和20μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時吸光值,分別記為A3和A4。△A測定管=A3-A4。
乙醇脫氫酶(ADH)檢測試劑盒
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