標題：酸性磷酸酶染色液（*法）

產(chǎn)品概述

產(chǎn)品名稱： 酸性磷酸酶染色液(*法)
規(guī)格：2X50ml
用途：酸性磷酸酶染色
注意事項：主要由孵育液、硫化液、陰性對照等組成。染色后酶活性部位呈棕黑色硫化鉛沉淀。
儲存條件：4℃,避光,6個月
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為蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與功能研究， 需將蛋白質(zhì)分離、 純化， 從而提高其比活。 分離蛋白質(zhì)一般
用等電點沉淀、 鹽析和有機溶劑分級分離。 而純化則常用層析法、 分子篩和離子交換法。 可
能的話， 用親和層析。 后提純用電泳及等電點聚焦技術(shù)。
分離、 純化方法基于：
1. 根據(jù)分子大小
（1） 透析和超過濾 利用蛋白質(zhì)分子不能透過半透膜， 使蛋白質(zhì)和其他小分子物質(zhì)分開，
叫透析。 利用壓力或離心力， 強使水和其他小分子溶質(zhì)通過半透膜， 叫超過濾。
（2） 密度梯度離心 如果蛋白質(zhì)顆粒在具有密度梯度的介質(zhì)（常用蔗糖梯度） 中離心時，
質(zhì)量和密度大的顆粒比質(zhì)量和密度小的顆粒沉降快并且每種蛋白質(zhì)顆粒沉降到與自身密度
相等的介質(zhì)梯度時， 即停止不前， 后在各種離心管中被分離成各自獨立的區(qū)帶， 分部分收
集。
（3） 分子篩層析 也叫凝膠過濾。 它是根據(jù)分子大小分離蛋白質(zhì)混合物的有效的方法
之一。當不同分子大小的蛋白質(zhì)混合液通過裝填有高度水化的惰性多聚體（常用葡聚糖凝膠）
和瓊脂糖凝膠的層析柱時， 比凝膠“網(wǎng)眼” 大的蛋白質(zhì)分子不能進入“網(wǎng)眼” 而被排阻在凝
膠顆粒之外， 后隨洗脫劑流出。 比“網(wǎng)眼” 小的分子則進入凝膠顆粒的內(nèi)部。
2. 利用溶解度差別
（1） 等電點沉淀和 pH 控制 當?shù)鞍踪|(zhì)混合物的 pH 被調(diào)到其中一種成分的等電點 pH 時，
則該蛋白質(zhì)大部或全部將沉淀下來， 那些等電點高于或低于該 pH 的蛋白質(zhì)仍留在溶液中。
這樣沉淀出來的等電蛋白保持著天然構(gòu)象， 能再溶解。
（2） 鹽析 它是蛋白質(zhì)制劑的分離和純化過程中常用的方法之一。 常用高濃度中性鹽，
如（NH 4 ） 2 SO 4 ， HgCl 2 等， 它們影響蛋白質(zhì)溶解度的能力是它們離子強度的函數(shù)。 鹽析法能
保持蛋白質(zhì)的天然構(gòu)象， 能再溶解。
（3） 有機溶劑分級分離 乙醇、 丙垌等有機溶劑能加強同一或相鄰蛋白質(zhì)分子中相反電
荷之間的吸引力， 使蛋白質(zhì)分子趨于凝集、 沉淀。 操作須在低溫下進行。 
酸性磷酸酶染色液(*法)
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