預(yù)染色蛋白marker特征和應(yīng)用

描述：預(yù)染色蛋白分子量標(biāo)準(zhǔn)Marker在蛋白凝膠電泳和轉(zhuǎn)膜時(shí)肉眼可見，因而可以動(dòng)態(tài)指示蛋白條帶的遷移位置。預(yù)染色蛋白Marker還可隨目的蛋白一起轉(zhuǎn)膜并在膜上清楚顯現(xiàn)，因而可以用肉眼直接觀察蛋白轉(zhuǎn)膜是否成功。同時(shí)還能為膜的切割提供肉眼可見的指示，方便而安全地把膜分割用于多重抗體檢測(cè)。在Western Blot完成后，根據(jù)預(yù)染色蛋白Marker的位置，可以方便地估計(jì)目的蛋白條帶的分子量大小。

特征和應(yīng)用：

即開即用

電泳時(shí)預(yù)染蛋白Marker肉眼可見

預(yù)染蛋白條帶可轉(zhuǎn)移到膜上

免除凝膠染色，免除膜染色

用于估計(jì)蛋白條帶大小和位置。

注意事項(xiàng)：

1.         開管前簡(jiǎn)短離心以避免丟失。即開即用，用前切勿加熱變性。

2.         推薦加樣量為：每5 mm寬加樣孔(1.5 mm厚凝膠)加5-10µl。更寬加樣孔(>5mm)和厚凝膠( >1.5 mm)酌情多加。窄孔(<5 mm)薄膠(<1.5 mm)酌情少加。

3.         轉(zhuǎn)膜后膜上沒有或僅有很淡的預(yù)染蛋白Marker，說明電轉(zhuǎn)移方向不對(duì)或時(shí)間不足。大孔徑膜材料和非標(biāo)準(zhǔn)轉(zhuǎn)膜方法能使小分子蛋白Marker穿膜而過。

4.         由于光反射的因素，肉眼觀察同等量預(yù)染蛋白Marker的顏色深淺程度依次為：印跡膜上的預(yù)染蛋白>附于白色不透明襯底的凝膠上的預(yù)染蛋白>無襯底透明凝膠上的預(yù)染蛋白。

5.         電泳后預(yù)染色Marker的分離效果、是否清楚顯示每一條帶，取決于預(yù)染蛋白條帶大小、凝膠濃度、交聯(lián)度和電泳速度。