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甘油檢測試劑盒的含量測定
甘油含量化學方法有很多,比色法,滴定法.甘油在強堿性條件下,與Cu2+定量形成絳藍色的甘油銅溶液。根據(jù)朗伯-比爾定律,溶液吸光度A與吸光物質(zhì)濃度C成正比:A=kC。甘油配制濃度C1與衍生的分析甘油銅濃度C有如下關(guān)系:C=k1C1,k1為稀釋系數(shù),則吸光度值與甘油配制濃度有如下正比關(guān)系: A=kk1C1+ε,k、k1為常數(shù),ε為系統(tǒng)誤差。先根據(jù)吸光度與甘油配制濃度C1做出關(guān)系曲線:,然后確定最佳線性擬合范圍,最終得出擬合線性方程,程序化后,用于甘油含量的快速測定。
檢測過程中的干擾
1.根據(jù)過程中所給定的時間甘油若能轉(zhuǎn)化*,則可斷定沒有干擾發(fā)生。 2. 反應結(jié)束后,可加入一些甘油重新檢測(定性或定量):如果加入標準物質(zhì)后,吸光度值會隨之改變,則可斷定沒有干擾發(fā)生。 3. 操作過程中的錯誤和干擾可通過兩個樣品體積的平行實驗測得(如0.100ml和0.200ml):測得的吸光度值差應與樣品體積成比例關(guān)系。當測定固體樣品時,可稱取不同質(zhì)量(如1g和2g)于同一100ml容量瓶中,測得的吸光度值差及樣品的質(zhì)量應與樣品的體積成比例關(guān)系。 4. 樣品所含物質(zhì)帶來的可能干擾可通過加入內(nèi)標來控制:除去樣品、空白及標準的檢測外,樣品加檢測對照溶液也要檢測的,測得的吸光度值差可計算干擾。 5. 通過回收試驗可測定可能的損失:分別測定加入標準與不加入標準的樣品,在誤差范圍之內(nèi)可定量測定附加物。
檢測總結(jié):
(a)液體樣品: 清澈的或稍有些顏色的,pH大約為中性的液體樣品可以直接檢測。
(b)酸性樣品: 如果樣品為> 0.1 mL的未被稀釋的酸性樣品(如葡萄酒或果汁),必須用2 M NaOH調(diào)節(jié)pH到大約7.4,然后在室溫中孵育30分鐘。
(c)含二氧化碳樣品: 樣品中含有大量的二氧化碳,如:啤酒,必須用2 M NaOH調(diào)節(jié)pH到大約7.4,并緩慢的用玻璃棒攪拌。
(d)有顏色的樣品: 測試中附加樣品空白,如:樣品中不含有GK,在這種情況下,樣品必須附加樣品空白。
(e)重顏色的樣品: 如果未經(jīng)稀釋的樣品顏色非常深,需要向每10mL的樣品中加入0.2g聚乙烯聚吡咯烷酮(PVPP),充分混合5分鐘,然后用Whatman No. 1濾紙過濾。
(f)固體樣品: 均質(zhì)或粉碎固體樣品,然后加入到蒸餾水中,并過濾。
(g)樣品含有脂肪: 需要用超過脂肪沸點的水進行提取,如:將100mL容量瓶加熱到60°C,然后恢復至室溫,并補液至刻度線,放置冷藏箱中15-30分鐘,過濾,棄去最初的幾mL濾液,選擇澄清的或稍有些乳白色的懸浮液進行測試。也可以選擇使用Carrez 溶液進行澄清。
(h)樣品中含有蛋白: 使用Carrez 溶液去除樣品中的蛋白。
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