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酸性轉(zhuǎn)化酶(Acid invertase, AI)檢測(cè)原理!
酸性蔗糖轉(zhuǎn)化酶 分為可溶性酸性蔗糖轉(zhuǎn)化酶 和細(xì)胞壁束縛蔗糖轉(zhuǎn)化酶 :可溶性酸性蔗糖轉(zhuǎn)化酶是一種液泡酶,存在于植物細(xì)胞的液泡中, 催化蔗糖水解成己糖,起著調(diào)節(jié)植物組織中糖的積累和液泡中蔗糖利用的作用。細(xì)胞壁束縛的酸性Inv 主要參與韌皮部質(zhì)外體卸載時(shí)蔗糖的分解,以保持庫(kù)-源之間蔗糖的濃度梯度。在調(diào)控植物衰老及果實(shí)發(fā)育中起重要作用。
檢測(cè)原理:
蔗糖轉(zhuǎn)化酶(Invertase,Ivr)催化蔗糖不可逆地分解為果糖和葡萄糖,是高等植物蔗糖代謝關(guān)鍵酶之一。根據(jù)適 pH,Ivr分為酸性轉(zhuǎn)化酶(AI)和中性轉(zhuǎn)化酶(NI)兩種類型。AI(EC 3.2.1.26)主要存在于細(xì)胞液泡或自由空間中,適 pH 為4.5~5.0(酸性),通過(guò)降解液泡中蔗糖,調(diào)節(jié)液泡中蔗糖的利用和果實(shí)內(nèi)糖類的積累。
AI催化蔗糖降解產(chǎn)生還原糖,進(jìn)一步與3,5-二硝基水楊酸反應(yīng),生成棕紅色氨基化合物,在510nm有特征光吸收,在一定范圍內(nèi)510nm光吸收增加速率與AI活性成正比。
生物試劑的使用常識(shí):
(1)試劑切忌與手接觸(有些試劑有強(qiáng)腐蝕性、等特性)。
(2)要用潔凈的藥勺,量筒或滴管取用試劑,絕對(duì)不允許用同一種工具同時(shí)連續(xù)取用多種試劑。取完一種試劑后,應(yīng)將工具洗凈(藥勺要擦干)后,才可取用另一種試劑。
(3)試劑取用后一定要將瓶塞蓋緊,不可放錯(cuò)瓶蓋和滴管,絕不允許張冠李戴,用完后請(qǐng)及時(shí)將瓶放回原處,以免遺忘,帶來(lái)不便。
(4)已取出的試劑不能再放回原試劑瓶?jī)?nèi)(怕產(chǎn)生原試劑的再次污染)。
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