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土壤堿性磷酸酶

更新時(shí)間:2019-11-19      瀏覽次數(shù):4342

億訊生物專業(yè)提供土壤堿性磷酸酶,產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定,*,確保銷售給客戶的產(chǎn)品是能夠符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),適合客戶要求的產(chǎn)品。本產(chǎn)品*,歡迎新老客戶前來咨詢訂購.

測定意義:                          

土壤磷酸酶是一類催化土壤有機(jī)磷化合物礦化的酶,其活性的高低直接影響著土壤中有機(jī)磷的分解轉(zhuǎn)化及其生物有效性,是評價(jià)土壤磷素生物轉(zhuǎn)化方向與強(qiáng)度的指標(biāo)。土壤磷酸酶受到土壤碳、氮含量、有效磷含量和pH顯著影響。通常按照其適pH范圍,分為堿性、中性和酸性三種類型磷酸酶。

測定原理:

堿性環(huán)境中,S-AKP/ALP催化磷酸苯二鈉水解生成苯酚和磷酸氫二鈉,通過測定酚的生成量即可計(jì)算出S-AKP/ALP活性。

需自備的儀器和用品:

可見分光光度計(jì)、臺式離心機(jī)、37℃恒溫培養(yǎng)箱、分析天平、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、冰、蒸餾水、無水乙醇和甲苯。

試劑組成和配制:

試劑一:液體×1瓶,4避光保存。

試劑二:粉劑×1瓶,4℃保存。用前加50mL蒸餾水充分溶解。

試劑三:液體×1瓶,4℃保存。

試劑四:粉劑×1瓶,4℃避光保存。臨用前加1152μL無水乙醇(自備),48 μL蒸餾水充分溶解。變褐色后不能再使用)

標(biāo)準(zhǔn)品:液體×1瓶,2 μmol/mL苯酚標(biāo)準(zhǔn)液,4℃保存。

催化反應(yīng):

稱取風(fēng)干混勻土壤約0.1g,加入0.05mL甲苯(自備),輕搖15min;加0.4 mL試劑一并且搖勻后,置于37℃恒溫培養(yǎng)箱,開始計(jì)時(shí),催化反應(yīng)24h;到時(shí)后迅速加入1mL試劑二充分混勻,以終止酶催化的反應(yīng)。10000rpm室溫離心10min,取上清液置于冰上待測。

顯色反應(yīng):

1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30 min以上,調(diào)節(jié)波長到660 nm,蒸餾水調(diào)零。

2. 空白管:取1mL玻璃比色皿,加入50 μL蒸餾水100 μL試劑三,20 μL試劑四,充分混勻,顯色后再加蒸餾水830 μL,混勻后室溫靜置30 min,于660 nm測定吸光度,記為A空白管。

3. 標(biāo)準(zhǔn)管:1mL玻璃比色皿,加入50 μL標(biāo)準(zhǔn)液100 μL試劑三,20 μL試劑四,充分混勻,顯色后再加蒸餾水830 μL,混勻后室溫靜置30 min,于660 nm測定吸光度,記為A標(biāo)準(zhǔn)管。

4. 測定管:1mL玻璃比色皿,加入50 μL上清液,100 μL試劑三,20 μL試劑四,充分混勻,顯色后再加蒸餾水830 μL,混勻后室溫靜置30 min,于660 nm測定吸光度,記為A測定管。

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