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HEPES緩沖鹽溶液使用說明
【產(chǎn)品名稱】 :HEPES緩沖鹽溶液
【產(chǎn)品規(guī)格】 :100ml 【儲存條件】 :-20℃保存
【有效期】 :1年
【產(chǎn)品簡介】 :
HEPES緩沖鹽溶液(2×HeBS)是一種常用的細(xì)胞轉(zhuǎn)染溶液,主要由HEPES、氯化鈉、磷酸鹽等組成,其最適pH值為7.05~7.12,經(jīng)過濾除菌處理;影響磷酸鈣轉(zhuǎn)染效率的因素主要有沉淀中DNA含量、DNA在細(xì)胞上停留的時間、休克時間;2×HeBS要求DNA濃度在10~50μg為宜,Hela、BALB等細(xì)胞沉淀放置16h,CHO、DUKX、BⅡ等細(xì)胞可以通過甘油、DMSO進(jìn)行熱休克處理以提高轉(zhuǎn)染效率。
本產(chǎn)品僅供科研實(shí)驗用,不做其它用途!
【主要成分】 :
主要由HEPES.氯化鈉、磷酸鹽、去離子水等組成,經(jīng)過濾除菌。
【注意事項】 :
1、注意無菌操作 ,盡量避免污染。
2、加入2xHeBS(pH7.05) 500ul到上述含有DNA的500μl溶液后,應(yīng)在1~2min內(nèi)加入到細(xì)胞中,時間間隔不宜過久,以免影響轉(zhuǎn)染效果。
3、轉(zhuǎn)染 12~24h后,可以加入終濃度為10mmol/L的J酸鈉溶液,可以提高病毒滴度。
4、收集病毒. 上清時,可以每隔12h收集-次,但同時應(yīng)補(bǔ)足培養(yǎng)液。這種情況下,病毒滴度沒有明顯下降。
5、 4℃ 500g離心5min收集上清目的在于去除活細(xì)胞。
6、該試劑用于轉(zhuǎn)染時,應(yīng)檢測其轉(zhuǎn)染效率,好的轉(zhuǎn)染效率應(yīng)介于30~60%之間。
7、為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗服并戴一-次性手套操作。
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