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雙熒光染色試劑盒的注意事項(xiàng)
【產(chǎn)品名稱】 :雙熒光染色試劑盒
【產(chǎn)品規(guī)格】 :100T
【儲存條件】 :2-8℃
【有效期】 :6個(gè)月
【產(chǎn)品介紹】 :
細(xì)胞凋亡(Apoptosis)的檢測方法有形態(tài)學(xué)、生物化學(xué)、DNA片段化檢測方法以及TUNEL等標(biāo)記片段化DNA方法,但從細(xì)胞凋亡概念產(chǎn)生的歷史及準(zhǔn)確性方面考慮,使用顯微鏡進(jìn)行的形態(tài)學(xué)觀察也是很重要的;細(xì)胞死亡的檢測可以通過熒光色素染色區(qū)分活細(xì)胞、死細(xì)胞,測定細(xì)胞代謝活性和形態(tài)學(xué)觀察,這些方法都是利用細(xì)胞凋亡這種情況進(jìn)行測定的,因而不一定反映實(shí)際情況,MTT法是測定線粒體中特有酶的活性,反映細(xì)胞數(shù)目的變化,其結(jié)果與細(xì)胞死亡的數(shù)目未必完全一致。
Acridine Orange屬于三環(huán)雜芳香燃料,可以標(biāo)記DNA、RNA,屬于異染性熒光染料,AO常用于細(xì)胞內(nèi)DNA和RNA進(jìn)行檢測,AO與核酸結(jié)合方式主要有:1、插入性結(jié)合,AO嵌入核酸雙鏈的堿基對之間,這種結(jié)合方式主要為AO與DNA的結(jié)合,其熒光發(fā)射峰為530nm,激發(fā)后呈綠色熒光;2、靜電吸引,帶正電荷的AO與單鏈核酸的磷酸根(帶負(fù)電荷)產(chǎn)生靜電間的吸引結(jié)合,這種結(jié)合方式主要為AO與RNA的結(jié)合,其熒光發(fā)射峰為640nm,激發(fā)后呈紅色熒光,少量結(jié)合會呈桔黃色或桔紅色熒光。因此AO嵌合到雙鏈DNA分子中顯綠色,與DNA單鏈或RNA結(jié)合時(shí)發(fā)橙紅色熒光;Ethidium Bromide嵌合到雙鏈DNA或RNA的堿基對中,無堿基特異性,發(fā)紅色熒光;AO可透過活細(xì)胞膜,EB不能通過與活細(xì)胞膜具有相同通透性的細(xì)胞膜。該試劑僅用于科研領(lǐng)域,不適用于臨床診斷或其他用途。
注意事項(xiàng):
1、用能通過活細(xì)胞膜與DNA結(jié)合后發(fā)藍(lán)色熒光的Hoechst33342和只能通過死細(xì)胞與DNA結(jié)合后發(fā)紅色熒光的Propidium Iodide對細(xì)胞進(jìn)行雙染的方法也比較常用。
如有低溫離心機(jī)進(jìn)行離心效果更佳。
操作過程中應(yīng)注意減少試劑(A)、試劑(B)暴露于強(qiáng)光下的時(shí)間。
EB Solution有一定毒性,請小心操作。
為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
雙熒光染色試劑盒的注意事項(xiàng)
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