凍干粉標(biāo)準(zhǔn)菌株使用教程

“標(biāo)準(zhǔn)菌株:由國(guó)內(nèi)或國(guó)際菌種保藏機(jī)構(gòu)保藏的,遺傳學(xué)特性得到確認(rèn)和保證并可追溯的菌株[1]。標(biāo)準(zhǔn)菌株是在給某細(xì)菌定名、分類記載和發(fā)表時(shí),為了使定名準(zhǔn)確和作為分類概念的準(zhǔn)則,以純粹活菌(可繁殖)狀態(tài)所保存的菌種。 標(biāo)準(zhǔn)菌株也稱為模式菌株(type strains),通常需要由至少兩個(gè)不同國(guó)家的專門保藏機(jī)構(gòu)保藏的菌株,一個(gè)菌株在同一個(gè)保藏機(jī)構(gòu)有且僅有永-久保藏號(hào)

【冷凍管開(kāi)封】

用浸過(guò)75%酒精的脫脂棉嚴(yán)格消毒冷凍管蓋。

【菌株復(fù)溶】

無(wú)菌環(huán)境中旋開(kāi)裝有復(fù)溶液的滴瓶蓋，吸取1ml 左右復(fù)溶液，加入到冷凍管中。輕輕振蕩，使凍干菌

株溶解呈懸浮狀。

【菌株復(fù)壯】

用無(wú)菌吸管吸取菌懸液，轉(zhuǎn)移到復(fù)溶液滴瓶中。做好標(biāo)識(shí)，在適宜溫度下培養(yǎng)。細(xì)菌在30-35℃培養(yǎng)

箱中培養(yǎng)24-48h，真菌在20-25℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24-72h（必要時(shí)，可適當(dāng)延長(zhǎng)培養(yǎng)時(shí)間）。

【菌株傳代】

將得到的菌株的新鮮培養(yǎng)物轉(zhuǎn)接到適宜的固體培養(yǎng)基及液體培養(yǎng)基中（盡量增大接種量：如用無(wú)菌吸

管吸取≥50μl 新鮮培養(yǎng)物至固體培養(yǎng)基，邊移動(dòng)邊緩慢釋放），適宜溫度下培養(yǎng)，用以菌株的保藏、傳

代及制備工作菌株。

【注意事項(xiàng)】

1、菌種活化前，將冷凍管保存在低溫、清潔、干燥的環(huán)境中，長(zhǎng)時(shí)間室溫下放置會(huì)導(dǎo)致菌種衰退；

2、冷凍管開(kāi)封、凍干粉復(fù)溶、菌株恢復(fù)培養(yǎng)等操作應(yīng)在無(wú)菌條件下進(jìn)行；

3、一些菌種經(jīng)過(guò)冷凍干燥保存后，延遲期較長(zhǎng)，部分需連續(xù)兩次繼代培養(yǎng)才能正常生長(zhǎng)；

4、苛養(yǎng)菌的培養(yǎng)需采用含特定營(yíng)養(yǎng)成分的培養(yǎng)基，敬請(qǐng)正確選擇，不清楚時(shí)來(lái)電詢問(wèn)；

5、某些厭氧菌的培養(yǎng)，自開(kāi)封到接種完成，均需以無(wú)氧氣體充填，以保持厭氧狀態(tài)；培養(yǎng)過(guò)程中亦要保

持厭氧狀態(tài)；

6、某些菌種，如肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌、淋病奈瑟菌等需要5-10%CO2 促進(jìn)生長(zhǎng)；

7、如發(fā)現(xiàn)冷凍管蓋松動(dòng)、復(fù)溶液渾濁等異常情況，應(yīng)停止使用對(duì)應(yīng)產(chǎn)品。

8、部分菌種有致病性、擴(kuò)散性，請(qǐng)專業(yè)人員在專業(yè)環(huán)境下有保護(hù)性操作。

【保藏條件】-20℃保存（復(fù)溶液于2-25℃保存）

【保藏時(shí)間】24 個(gè)月，應(yīng)根據(jù)菌種狀況及時(shí)轉(zhuǎn)接