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DNS試劑(GB 20287)參考國家標準GB 20287-2006

更新時間:2022-04-21      瀏覽次數(shù):1162

DNS試劑(GB 20287)參考國家標準GB 20287-2006


植物體內(nèi)的碳素營養(yǎng)狀況以及農(nóng)產(chǎn)品的品質形狀,常以糖含量作為重要指標。單糖和某些寡糖(如麥芽糖)含有游離的醛基或酮基,具有還原性,屬于還原糖;多糖和蔗糖等屬于非還原糖??梢岳枚嗵悄鼙凰崴鉃閱翁堑奶匦酝ㄟ^測定水解后的單糖含量對總糖進行測定。

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檢測原理是用羧甲基纖維素鈉鹽(CMC)為底物,經(jīng)纖維素酶水解后生成還原糖,后者能與反應,其中硝基還原成氨基,使溶液變?yōu)槌壬?,橙色的深度與還原糖的濃度成正比。因此可用比色法求得還原糖的含量,進而求出纖維素酶活的大小。


稱取3,5-二硝基水楊酸3.15 g(化學純),加水500 mL。,攪拌5 s,水浴至45 ℃。然后逐步加入100 mL 0.2g/ mL的氫氧化鈉溶液,同時不斷攪拌。直到溶液清澈透明(注意:在加入氫氧化鈉過程中,溶液溫度不要超過48℃)。再逐步加入四水酒石酸鉀鈉91.0 g、苯2.50 g和無水亞硫酸鈉2.50 g。繼續(xù)45 ℃水浴加熱,同時補加水300 mL,不斷攪拌,直到加入的物質*溶解。停止加熱,冷卻至室溫后,用水定容至1000 mL。用燒結玻璃過濾器過濾。取濾液,儲存在棕色瓶中,避光保存。室溫下存放7 d后可以使用,有效期為12個月。


制作標準曲線 取9支大試管,分別按表一順序加入各種試劑。 表一 將上述各管溶液混后,在紫外可見分光光度計上用綠色濾光片(520nm) 進行比色測定,用空白管溶液調(diào)零,記錄光密度值。以光密度值為橫坐標,以葡萄糖濃度為縱坐標,繪制標準曲線。


DNS試劑用途:

1.在生化試驗中,DNS常用于還原糖含量的測定。

2.也可用于生物質中半纖維素含量的測定。它們均要與標準葡萄糖曲線進行比對。


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